Mikroskop Bakımı

  • Belirli bir teknik ve prosedürle elde edilebilen en iyi sonuçlara aşinalık, kullanıcının kirli optiklerin sonuçlarını tanımasına izin verir. Beklenen görüntüyü ve gerçekte elde edilen görüntüyü optimum keskinlik, kontrast ve kontaminasyona bağlı görsel artefaktların yokluğu açısından karşılaştırma yeteneği, kullanıcının mikroskopun kirli olup olmadığını hemen fark etmesini sağlar. Görüntü netliği veya kontrastı optimum değilse, mikroskop optiklerinin temiz olmadığı olasılığı yüksektir. Kirin yerini belirlemek için aşağıdakileri uygulayın:
    • Hedefleri ve kameraları ipliklerinin içinde az miktarda dikkatlice döndürün.
    • İlk önce üst ve sonra alt yüzeylere odaklanırken örneği hareket ettirerek slayt ve kapak kaymasını kontrol edin.
    • Kondenseri yukarı ve aşağı hareket ettirirken ve varsa ön merceği hafifçe döndürerek kontrol edin. 

Etkilenen optik yüzey, şüpheli bir optik bileşen taşındığında ve kir bu hareketi izlediğinde tanımlanır. Bu kuralın tek istisnası kameradır. Kamera içinde bulunan kir (genellikle görüntü sensörünü koruyan optik camda) kamera hareket ettiğinde hareket etmeyecektir. Optik yüzeylerde daha büyük toz parçacıkları ve çizikler için makroskopik bir kontrol, bir büyüteç (3x ila 6x büyütme ile) veya ters diyaframdan görüntülenen bir göz merceği (aslında bir göz merceğinin karşı ucundan bakarken) yapılabilir. ). Kirli bir objektif ön merceği, objektifin arka açıklığı boyunca eşit olarak aydınlatılmış bir yüzey incelenerek kolayca tanımlanabilir. Dahili mercek organizasyonu, ön merceğin dış yüzeyinde bulunan en küçük kontaminantların büyütülmüş bir görüntüsünü üretir.

Toz (örneğin slaytlardan cam tozu, mikroskobik cildinden pullar, giysilerden lifler, ilkbahar ve yaz çiçeklenmeden polen) ve diğer kirler (sıvı veya kurumuş gömme veya daldırma ortamı) arasında ayrım yapmak çok önemlidir. 3), kültür çözeltileri, yanlış temizleme girişimlerinden kaynaklanan kalıntılar, parmak izleri ve gres). Toz partikülleri gevşek bir şekilde dinlenebilir veya optik yüzeylere az çok yapışabilir. Diğer kirler suda çözünür veya sadece organik çözücüler kullanılarak tamamen temizlenebilir. Ancak, bulanık bir görüntü her zaman kirden kaynaklanmayabilir. Yanlış kalınlıkta bir kapak kayması ile birlikte büyük bir sayısal diyafram açıklığı olan bir objektif kullanılması bulanık görüntülere (küresel sapma) neden olabilir. Yüksek sayısal açıklığın kuru hedefleri normalde bir düzeltme yakasına sahiptir, küresel sapmanın telafisine izin veren. Pek çok düzeltilmiş daldırma hedefi, en iyi görüntü gerekiyorsa, 170 mikrometre kalınlığında özel olarak seçilmiş kapak slipleri gerektirir.Daldırma hedefleri sadece uygun, kabarcıksız bir daldırma yağı ile birlikte kullanılmalıdır. Daldırma yağının viskozitesi, istenmeyen yerlere herhangi bir ani göçü en aza indirmesine rağmen, derhal çıkarılmazsa ve birikmesine izin verilirse, yerçekimi ve kılcal kuvvetlerin etkileri sonuçta yağın alt istasyon mekanizmasının ve mikroskop standının parçalarına hareket etmesine neden olur, ve belki de objektifin içine. Bu birikim kolayca görülemeyebilir ve mekanik veya optik problemler bir mikroskop onarım tesisi tarafından servis gerektirecek kadar ciddi hale gelene kadar fark edilmeyebilir. Daldırma ortamı olarak nadiren önerilen aromatik amin, anisol kullanımı keskinlik ve kontrast kaybı ile sonuçlanır. Anisole, ön merceklerin, özellikle de daha eski hedeflerin çimentolarına saldırabilir ve bundan kaçınılmalıdır.

Katkıda Bulunan Yazarlar

Rudi Rottenfusser – Zeiss Mikroskopi Danışmanı, 46 Landfall, Falmouth, Massachusetts, 02540.

Erin E. Wilson ve Michael W. Davidson – Ulusal Yüksek Manyetik Alan Laboratuvarı, 1800 Doğu Paul Dirac Dr., Florida Eyalet Üniversitesi, Tallahassee, Florida, 32310.

Optik Yüzeyler

İçbükey veya dışbükey yüzeyler (örneğin, kuru hedeflerin ve kondansatörlerin ön merceği veya bazı merceklerin göz merceği), daldırma hedeflerinin çoğunun ön merceği gibi düzlemsel paralel veya düz yüzeylerden ve kondansatörlerden ayırt edilmelidir. , filtreler ve kamera sensörlerini kaplayan koruyucu cam veya ışığın çıktığı açıklık. İçbükey veya dışbükey yüzeyler, bir sonraki bölümde açıklandığı gibi pamuk veya yeni polyester çubuklar kullanılarak temizlenir. Kolayca erişilebilen düz yüzeyler, yumuşak tek kullanımlık selüloz mendillerle benzer şekilde temizlenebilir. Mikroskop optiği optik cam, kuvars veya polimerlerden oluşabilir. Hemen hemen tüm bileşenlerin üst yüzeyi, kaçak ışığı en aza indirmek için yansıma önleyici bir tabaka ile kaplanacaktır. Bu kaplamaların bazıları, yumuşaklıkları nedeniyle silinebilir veya silinmeyebilir. Genellikle, yansıma önleyici kaplamalar magnezyum florürden oluşur ve sadece amonyak ve asit içermeyen maddelerle temizlenmelidir. Tehlikeli çözücülerin çeşitli alternatiflerinin mikroskop temizliğinde etkili olduğu bulunmuştur ve farklı mikroskopistler ve üreticiler tarafından çeşitli temizlik maddelerinin yanı sıra temizlik malzemeleri de önerilmektedir. Bazı optik bileşenler, organik çözücülere duyarlı siyah yansıma önleyici yüzeylerle çevrilidir. Göz merceğinin plastik ve kauçuk kısımlarına benzer şekilde aseton, metilen klorür ve kloroform dahil olmak üzere organik çözücüler saldırır. ve farklı mikroskoplar ve üreticiler tarafından çeşitli temizlik maddelerinin yanı sıra temizlik malzemeleri de önerilmektedir. Bazı optik bileşenler, organik çözücülere duyarlı siyah yansıma önleyici yüzeylerle çevrilidir. Göz merceğinin plastik ve kauçuk kısımlarına benzer şekilde aseton, metilen klorür ve kloroform dahil olmak üzere organik çözücüler saldırır. ve farklı mikroskoplar ve üreticiler tarafından çeşitli temizlik maddelerinin yanı sıra temizlik malzemeleri de önerilmektedir. Bazı optik bileşenler, organik çözücülere duyarlı siyah yansıma önleyici yüzeylerle çevrilidir. Göz merceğinin plastik ve kauçuk kısımlarına benzer şekilde aseton, metilen klorür ve kloroform dahil olmak üzere organik çözücüler saldırır.

  • Mikroskop optiklerini temizlemek için etkili olduğu kanıtlanmış birçok çözücünün en önemli tehlikelerinden biri, lens düzeneğinde kullanılan çimentoları çözme potansiyeline sahip olmalarıdır (optikte kalmasına izin verilirse daldırma yağlarının kendileri gibi). Daha eski mikroskoplarda lensler, Kanada balzamı gibi alkolde çözünür bir çimento kullanılarak çimentolandı. Benzen, o zamanlar oldukça etkili bir lens temizleme çözücüsü olarak kabul edildi, ancak balzamın benzenindeki ve lens için kullanılan diğer çimentoların yüksek çözünürlüğü nedeniyle, lensle teması bir veya iki saniyeden fazla olmamak için her zaman büyük dikkat gösterilmelidir. montaj (ve lamelleri numune slaytlarına monte etmek için). Benzen deriden kolayca emilir, (bunun yanı sıra buharların solunması karaciğer hasarına neden olabilir) ve en yaygın mercek çimentoları genellikle alkolde çözünmeyen sentetik poliakrilik reçinelerden oluşur. Ksilen yıllardır optik yüzeyleri temizlemek için yaygın olarak kullanılmaktadır ve son derece yanıcı, toksik, kanserojen olmasına rağmen ve cilde temas hassasiyetine neden olsa da, ksilen benzenden daha az agresiftir. Her iki çözücü de lens temizleme çözücüsü olarak önerilmesine rağmen birçok mikroskopun mekanik ve optik bileşenleri için zararlıdır.Tescilli Histolene ve Histoclear çözücüleri, mikroskopi laboratuvarlarında ksilenin yerine geçerek popülerlik kazanmaktadır ve diğer enstrümanların temizliğinde de etkili olduğu bulunmuştur. Şekil 4’te, mikroskopların temizlenmesi için tasarlanmış çeşitli ticari ürünler gösterilmektedir. Saf damıtılmış su, suda çözünür herhangi bir kirlenme için en güvenli temizleme sıvısıdır, ancak bu yeterli değilse, ticari fotoğrafik lens temizleme sıvıları çok etkilidir ve az miktarda kullanıldığında hassas optikler için güvenlidir. Bazen seyreltik amonyak içeren ev tipi cam temizleme maddeleri önerilir, ancak bunlar rutin olarak kullanılmamalıdır. Optik yüzeyler, floresan filtre setlerinin bileşenleri, kameralar ve kamera adaptörleri dahil olmak üzere mikroskobun dahili çalışmaları asla kullanıcı tarafından temizlenmemelidir, ancak orijinal üreticinin deneyimli müşteri hizmetleri temsilcileri tarafından. Kullanıcı sadece objektif ön merceğin dış yüzeyini, kondenser ön merceğini, mercek göz merceklerini, cam rengini ve dönüşüm filtrelerini ve ışığın çıktığı açıklığı kaplayan koruyucu camın dış yüzeyini temizlemelidir.

Katkıda Bulunan Yazarlar

Rudi Rottenfusser – Zeiss Mikroskopi Danışmanı, 46 Landfall, Falmouth, Massachusetts, 02540.

Erin E. Wilson ve Michael W. Davidson – Ulusal Yüksek Manyetik Alan Laboratuvarı, 1800 Doğu Paul Dirac Dr., Florida Eyalet Üniversitesi, Tallahassee, Florida, 32310.

Temizlik Maddeleri ve Prosedürleri

Mikroskop optik yüzeylerini temizlemenin amacı, temizleme maddesinin kalıntılarını bırakmadan veya yüzeylere zarar vermeden tozu ve kiri tamamen temizlemektir. Aşağıdaki ekipman gereklidir:

  • Uzun, ince tahta çubuklar, tercihen bambu (Çin restoran tedarikçilerinden elde edilebilir) veya karşılaştırılabilir, çok esnek olmayan bir malzeme
  • Yüksek saflıkta pamuk
  • Optik bileşenleri temizlemek için emici polyester çubuklar
  • Optik yüzeyler için özel olarak tasarlanmış yumuşak kozmetik selüloz doku (Kimwipes lens temizliği için uygundur, ancak tipik yüz dokuları optik yüzeylere zararlı sert parçacıklar içerir)
  • Toz üfleyici veya kulak yıkama ampulü (laboratuvar tedarikçileri, eczaneler)
  • Arıtılmış su
  • 10 mililitre damıtılmış suda 5 ila 10 damla bulaşık deterjanı
  • Optik Temizleme Solüsyonu L (yüzde 85 petrol eteri, yüzde 15 izopropanol tarifi), saf petrol eteri (analitik olarak saf, kaynama noktası 44 santigrat dereceden az) gibi yağlı veya kirlerin giderilmesi için çözücü veya sadece temizlik için kapak slipleri, saf aseton

Daldırma ortamlarının kapak kaymalarından çıkarılması veya daldırma ortamının daldırma hedeflerinin ön merceklerinden çıkarılması gibi düz yüzeylerin kolay temizlenmesi için, seyreltilmiş bulaşık yıkama sıvısına batırılmış yumuşak doku uygundur. Genellikle araştırma laboratuvarlarında bulunan pürüzsüz lens kağıdı (Joseph kağıdı olarak adlandırılır), temizlik amaçlı değildir, ancak yalnızca optik bileşenlerin tozsuz depolanması ve korunması için tasarlanmıştır. Temizlik amacıyla, bu mercek kağıdı çok serttir; ayrıca kiri etkili veya hızlı bir şekilde emmez. Yüksek saflıkta pamuk temizleme dokusu tek istisnayı temsil eder. Diğer tüm optik yüzeylerin temizliği için, taze yapılmış pamuklu çubuklar, mercek dokusu veya polyester çubuklar kullanılır.

Pamuklu Çubukların Hazırlanması İşlem
görmemiş pamuklu çubuklar mikroskop temizliği için uygundur ve ticari olarak temin edilebilir veya aşağıdaki talimatlara göre monte edilebilir. Eczaneler tarafından rulo halinde satılan pamuk yünü, tipik olarak bir miktar sentetik lif içerir ve yüzde 100 pamuk yünü gibi hassas yüzeyler için uygun değildir.

  • Ellerinizi yıkayın (pudralı, lateks eldivenler uygun değildir).
  • Çubuğu temizleme çözeltisine (sulu veya organik çözücü) batırın. Sonuç olarak pamuk lifleri çubuğa daha iyi yapışır.
  • Çubuğu yüzde 100 pamuklu tomarın üzerine batırın ve bazı lifleri gevşetin. Pamuğu sıkıştırmayın, aksi takdirde lifler kolayca ayrılmaz.
  • Çubuğu, uçta düzgün, eliptik bir pamuk tomurcuğu oluşacak şekilde çevirin.
  • Pamuk ucunu kirden korumak için, çubuk plastik bir sandviç torbasında saklanmalıdır. Terleme ve gres (parmaklardan) temizleme yeteneğini önemli ölçüde etkileyeceğinden kullanılmamalıdır.
  • Her silme işleminden sonra pamuk ucunu çıkarın ve yeni bir pamuklu çubukla değiştirin.
  • Çubuk uzun süre kullanılabilir. Su bazlı çözeltiler ve organik çözücüler için ayrı çubuklar kullanın.
  • Yüksek saflıkta pamuklu lens temizleme dokusunun kullanılması tercih edilirse, tabakayı sopanın etrafına katlayın, böylece keskin bir nokta oluşur. Nokta ele alınmamalıdır. Dokuyu sadece bir kez kullanın ve sonra değiştirin. Polyester bezler artık iyice temizlenmedikçe kullanılabilir.

Temizleme Prosedürü

  • Hedefleri, göz merceklerini ve kameraları tozsuz bir yüzeye (örneğin taze alüminyum folyo) yerleştirin. Herhangi bir temizleme girişiminden önce, optik yüzey, bileşenin durumunu belirlemek için yansıyan ışık altında büyütme ile incelenmelidir. Aşındırıcı olduğu farz edilen ve başka bir temizlik yapılmadan önce çıkarılması gereken herhangi bir parçacık halindeki malzemenin varlığına özellikle dikkat edilmelidir. Oküler ve kondansatörler gibi daha büyük optikleri incelemek için 2x ila 3x’lik bir büyüteç merceği uygundur, hedeflerin daha küçük mercek öğeleri ise uygun inceleme için yaklaşık 5x ila 10x büyütme gerektirir. Temizlemede ilk adım olarak partikül maddenin bir lens yüzeyinden uzaklaştırılması çok önemlidir, çünkü herhangi bir parçacık aşındırıcı olabilir ve en yumuşak mercek dokusu ile bile yüzey boyunca fırçalanırsa çiziklere neden olabilir. Temizlenecek diğer tüm optik bileşenler mümkün olduğunca erişilebilir olmalıdır.
  • Tüm gevşek toz parçacıklarını sıkıştırılmış gaz toz bezi, hava üfleyici veya temiz bir deve fırçası ile üfleyin. Asla güçlü bir nefes alarak mercek yüzeylerinden toz atmayın ve mercek yüzeyine hafifçe hava üflediğinizden emin olun. En güvenli hava tozlama yöntemi, bebekler için kulak ve lavman şırıngaları olarak kullanılması amaçlanan modeller gibi kauçuk bir ampul veya balon kullanmaktır. Şırınganın ucunun lens yüzeyine değmemesine dikkat edin. En iyi tavsiye, mercek temizliği için basınçlı hava kutularının kullanılmasını önlemektir. Bunlarla, temizlenmekte olan yüzeye çarpan hava basıncını kontrol etmek zordur ve her zaman aşırı soğuk hava veya donma sıvısının bir lens yüzeyine atılması ve onarılamaz hasara neden olma riski vardır.
  • Suda çözünür tüm kiri saf suyla temizleyin. Bu adım başarısız olursa, seyreltilmiş bulaşık deterjanı çözeltisi kullanarak tekrarlayın. Kuru bir pamuklu çubukla kalan kalıntıları giderin, ancak önce bir nem filmi oluşturmak için yüzeyde açık bir ağızla nefes alın. Bunu yaparken, tükürük damlacıkları püskürtmemeye dikkat edin. Bu temizleme yöntemi için mercek kağıdı hazırlamak için etkili bir yöntem, bir doku parçasının dört köşesini de katlayarak, dokunun el değmemiş merkezini dışarıda bırakmaktır. Köşeler, dokuyu işlemek için bir gövde oluşturmak üzere hafifçe bükülebilir. Doku bu sap tarafından tutulduğunda ve dışarı atılan doku merkezi ile gerçekleştirilen silme işlemi, amaca uygulanabilecek kuvvet dokunun yaylanması ile sınırlanır. Dairesel silme hareketi bu şekilde uygulanabilir,
  • Yağlı kiri gidermek için başlangıçta seyreltik bir sıvı bulaşık deterjanı kullanın. Bu işlem tatmin edici bir sonuç vermiyorsa, bir solvent (Optik Temizleme Solüsyonu L veya petrol eteri) kullanarak temizlemeyi tekrarlayın. Yağlı kir daima bir çözücü kullanılarak temizlenmelidir. Pamuk veya polyester eküvyonu temizleme solüsyonuna batırın ve fazla sıvıyı çalkalayın. Pamuklu çubuktaki fazla sıvı, lensin kenarından akacak ve lens çimentosuna saldıracaktır. Sonuç olarak bu, bağlı bileşenler arasında çimentonun çıkarılmasına yol açabilir. Çözücü, mümkün olduğunca fazla kiri temizlemelidir. Pamuk tomurcuğundaki uçucu organik çözücülerin tutulma süresini arttırmak için, bazı kullanıcılar çözücüyü soğutur (-10 santigrat ila -20 santigrat derece). Soğutulmuş çözücülerin bir dezavantajı vardır. Düşük sıcaklıklarından dolayı, mercek yüzeyinde yoğunlaşma oluşabilir ve kalıntı bırakabilir. Bir çözücünün tutulma süresini iyileştirmek için daha uygun bir yöntem izopropanol eklemektir.

Temizleme, merkezden kenara spiral bir hareketle gerçekleştirilir (temizleme prosedürleri hakkında ayrıntılar için bkz. Şekil 5). Asla zikzak hareketlerini kullanarak silmeyin, çünkü bu sadece kiri yayar. Doku üzerinde herhangi bir partikül varsa lensin çizilme olasılığını en aza indirmek için cam mercek yüzeyine asla parmaklardan doğrudan basınç uygulanmamalıdır. Tüp mercekler gibi daha büyük optik yüzeylerde, spiral hareket başlangıçta ortada hareket etmeden önce ağız kenarından başlar ve bunu ancak kenar temizleme hareketini ortalamak için bir merkez izler. Çoğu durumda, her seferinde yeni bir uç kullanarak birkaç mendil önerilir.

  • Mikroskop optiklerini temizlemek için tüm çözeltiler kullanılamaz. Bazıları çok etkili bir şekilde temizlenir, ancak toksik (kloroform ve aseton) veya çevreye dost olmayan (karbon tetraklorür), diğerleri ise yüzey kalıntısı (ksilen, toluen ve dietileter) bırakır. Kalıntı, ksilen ve mutlak etanol kullanımının yanı sıra kir suda çözünür bileşenler içerdiğinde oldukça kolay oluşur. Kapak kaymalarından yağ ve gres çıkarılması gerektiğinde aseton önerilir. Aseton, birçok plastiğin yanı sıra kauçuğa da saldırır ve sonuç olarak, göz merceklerini temizlemek için kullanımı sorunlu olabilir. Ek olarak, aseton, sık kullanıldığında hedefler, kamera adaptör lensleri veya göz mercekleri gibi çimentolu optik bileşenlere saldırabilir. Aseton ayrıca özel organik kaplamaları çözebilir.Modern mikroskopların boyalı dış yüzeyleri toz boyalı ve son derece dayanıklıdır. Çok hafif nemli bir mikrofiber bezle iyi temizlenebilirler. Gevşek toz ve diğer kirler, yalnızca bu amaçla kullanılan yumuşak bir saç fırçası kullanılarak temizlenebilir. Mekanik bileşenlerin tamamen temizlenmesini ve cihazın etrafındaki sıvı dökülmelerini dikkatlice silmesinin ardından, stand ve masa alanındaki gevşek malzemeleri çıkarmak için esnek hortumlu küçük bir elektrikli süpürge ve yumuşak fırça eki kullanılabilir. Vakum fırçasıyla herhangi bir optik yüzeye dokunmaktan kaçınmak için çok dikkatli olunmalıdır.

Katkıda Bulunan Yazarlar

Rudi Rottenfusser – Zeiss Mikroskopi Danışmanı, 46 Landfall, Falmouth, Massachusetts, 02540.

Erin E. Wilson ve Michael W. Davidson – Ulusal Yüksek Manyetik Alan Laboratuvarı, 1800 Doğu Paul Dirac Dr., Florida Eyalet Üniversitesi, Tallahassee, Florida, 32310.